弧菌及其对弧菌病的防控措施的建议

秦生巨

（原中国医学细菌保藏管理中心弧菌噬菌体专业研究室主任）

一、弧菌的概论

弧菌是一类可引起肠道感染的细菌，菌体只有一个弯曲，呈弧状或逗点状，长0.8-3μm、宽0.5-1.5μm。弧菌属广泛分布于自然界，尤以水中为多，有100多种。弧菌会引发肠胃炎、食物中毒、霍乱、败血症等疾病。潜伏期5-72小时，平均24小时，恢复较快，病后免疫力不强，可重复感染。

95株弧菌的命名

基本信息

外文名称  Vibrio   

中文学名  弧菌(Vibrio)在国际普遍采用的（也是全世界最权威的）细菌分类的《伯杰细菌鉴定手册》中归属于原核生物界，细菌门，革兰氏兼性厌氧杆菌目，弧菌科，（弧菌属，气单胞菌属，邻单胞菌属，发光杆菌属，射光杆菌属）。目前已经命名的91种。

形态

弧菌菌体只有一个弯曲，呈弧状或逗点状。如霍乱弧菌。革兰氏染色阴性，长0.8-3μm、宽0.5-1.5μm，从病人新分离的细菌形态典型，人工培养后常呈杆状而不易与其他肠道菌区别。取病人米泔水样粪便直接涂片染色镜检，可见其相互排列如“鱼群”状。无芽孢和荚膜，有菌毛和一根单鞭毛，运动非常活泼。悬滴观察，可见其呈穿梭或流星样运动。

弧菌基因组

由2条环状染色体组成。大染色体约2.91Mb，G+C占46.9%；小染色体约1.072Mb，G+C占47.7%。总共有3885个开放阅读框（ORF）。霍乱毒素基因位于大染色体上整合的温和丝状噬菌体CTXΦ基因组内。

感染病症

该菌引起的食物中毒经烹饪不当的海产品或盐腌制品所传播。常见的为海蛰、海鱼、海虾及各种贝类，因食物容器或砧板生熟不分污染本菌后，也可发生食物中毒。该菌常年均可发生，潜伏期5-72小时，平均24小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样病症，有腹痛、腹泻、呕吐和低热，粪便多为水样，少数为血水样，恢复较快，病后免疫力不强，可重复感染。

该菌还可引起浅表创伤感染、败血症等。

弧菌的危害

副溶血弧菌肠炎

副溶血弧菌肠炎是由致病性副溶血弧菌引起的急性胃肠炎。

河弧菌肠炎

河弧菌肠炎由河弧菌(V.fluvialis)引起。河弧菌可引起散发性腹泻，在英国、美国、西班牙、非洲、中东、东南亚均有发病，各年龄组易感，但以婴幼儿和青少年多见。临床上有恶心、呕吐、腹痛及腹泻。腹泻量较多，有每天达7L者，因此常伴失水。少数粪便带粘液或血。病程1-3天。粪便排菌量甚高，可达10 /ml，置含氯化钠3%-7%条件下生长良好。

拟态弧菌肠炎

拟态弧菌(V.mimicus)与不典型的霍乱弧菌关系密切，性质相似，故于1981年命名为“拟态弧菌”。菌株在不含钠或仅含1%氯化钠的营养肉汤中生长良好，在河水和海水中均可生存，可自水生动物中分离出来。在美国、北美、新西兰、孟加拉及非洲国家均有病例报道。中国福建、北京、上海、江苏及浙江地区也有发病。呈散发或爆发。潜伏期3-72h，平均24h。主要症状有腹泻、呕吐及腹痛，大便呈水样或粘液血便。

霍利斯弧菌肠炎

霍利斯弧菌(V.hollisae)为嗜盐性弧菌，在培养基上有微弱的溶血环。本菌存在于海水中，患者病前大多有进食海产品史。发病以青壮年为多。腹泻症状严重，呈水样便，粘液便，少数呈血便。轻者自愈，重者应补液纠正失水及电解质紊乱。

溶藻性弧菌感染

溶藻性弧菌为海水中常见嗜盐性弧菌，1973年开始明确对人类致病，易污染食物，引起腹泻及创伤部位感染。

创伤弧菌感染

创伤弧菌(V.vulnificus)于1964年美国CDC自腹泻患者粪便分离出来。该菌可自海水、贝壳类及海鱼中分离到。发病以夏季为多。常在进食后24h发病。患者大多有发热、畏寒、呕吐及腹泻。除经口感染外，可经皮肤伤口入侵而发生局部感染并引起败血症，严重者发生DIC、休克并致死。有认为本菌系条件致病菌，在慢性病伴免疫功能低下者、高龄、糖尿症、血液病患者易发生严重败血症。

弗尼斯弧菌感染

此病首先发现于日本及东方一些国家，其后扩散至西方国家。呈爆发流行或散发性急性胃肠炎。临床上以腹泻及腹痛为主，伴恶心及呕吐。也有严重致死病例报道。此菌存在于海洋，产生肠毒素，为旅游者腹泻的病原之一。

相关最近的研究

2012年7月23日，英国环境、渔业以及水产养殖科学中心研究警告称，因全球变暖，大量病菌正在入侵北欧，导致霍乱和肠胃炎等疾病增加。

这项研究主要集中于波罗的海，因为这里正以空前的速度变暖，100年间海水温度上升了6.3到7.8摄氏度。研究人员发现，波罗的海温度上升促使水生细菌弧菌增长加速。弧菌通过食用贝类或海水进入人体后会引发多种感染疾病，包括霍乱、肠胃炎等。研究发现，水温每上升一摄氏度，弧菌数量就会增加200%。科学家警告称，随着海洋温度持续上升，欧洲北部地区沿海海水盐度在下降，弧菌正不断扩散。

二、弧菌及其弧菌病对水产养殖的危害

现在水产养殖中弧菌病的危害已被广大养殖户公认，究竟是那些弧菌是水生物常见的致病菌说法很多。副溶血弧菌，河弧菌，拟态弧菌，霍利斯弧菌，溶藻性弧菌，创伤弧菌，弗尼斯弧菌，溶藻弧菌，创伤弧菌，发光弧菌，费氏弧菌，鳝弧菌等。

但副溶血性弧菌对水产品养殖，尤其对南美白对虾养殖的危害是专家学者和养殖户意见比较一致的。本文就以副溶血弧菌为例浅谈弧菌及其弧菌病的防控措施，供大家讨论。

副溶血性弧菌

副溶血性弧菌是一种海洋性细菌，广泛分布在海水和海水养殖产品中，我国华东地区沿岸的海水中副溶血性弧菌检出率为47.5%-66.5%，海水中鱼、虾的平均带菌率为45.6%-48.7%，夏季可高达90%以上。

副溶血性弧菌对水生物有较强的毒力，其致病物质主要有不耐热性溶血毒素（TLH）、耐热直接溶血毒素（TDH）和相对耐热直接溶血毒素（TRH），这些毒素具有溶血活性、破坏肠粘膜和致死作用。

海水是副溶血性弧菌的主要污染源。副溶血性弧菌在海水中可存活47天。最适宜的生长温度为30-37℃，要求盐度25-30‰(盐度低于5‰不生长），pH值为8.0-8.5。

（一）临床症状及体征

溶血毒素具有直接溶血性，可使对虾多种细胞发生溶血，溶解对虾血液、细胞致死。耐热直接溶血毒素可造成对虾消化道组织损伤，回肠糜烂，胃粘膜炎，甚至肝胰脏、消化功能紊乱。还有人认为副溶血性弧菌产生脲酶，使对虾肠液积聚产生肠道积水，严重者可能出现拉白便现象。副溶血性弧菌的胞外产物可使对虾免疫力明显下降，生长速度慢，以致易引发其他多种疾病。

（二）在对虾养殖中的传染途径

1、随虾苗进入养殖池塘

副溶血性弧菌随同虾苗调运到养殖区，虾苗带弧菌，加上养殖水体带菌，放苗后，副溶血性弧菌严重超标。

2、随海水进入养殖池

海水本身就带副溶血性弧菌，况且大部分发病的虾塘所排的养殖污水又没有经过处理就进入大海，于是海水成了副溶血性弧菌的污染源。

3、其它途径传染到养殖地

副溶血性弧菌活力强，在海水中可存活47天。如果没有完善的预防措施和设施是不可能切断该菌的传播。

（三）在对虾养殖中的危害

1、从各种途径带入虾塘的高耐药性的副溶血性弧菌附在饲料、残饵、有机碎屑、死藻上不断繁殖，对虾吃食后，经口传播并定植在对虾消化道产生毒素引起组织损坏，并造成对虾肝功能紊乱及消化系统障碍。

2、副溶血性弧菌有侵袭性，对虾在脱壳时，通过虾体破口侵入虾体引起软组织感染或经血液循环（败血症）播散至肝胰脏等组织而引起坏死性感染。

（四）噬菌体裂解副溶血弧菌与毒素

美国Lightner教授认为EMS的病原是副溶血弧菌的特异变种，被噬菌体感染后发生变异，并促使细菌释放强力的毒素。泰国养虾届教父级人物暨泰国农业大学Chalor 认为，教授说：“EMS” 早期死亡综合症”（EarlyMortalitySyndrome）是有一种普通的细菌感染所致，该细菌是副溶血弧菌，被一种噬菌体（病毒）感染后可释放出强烈的毒素。它由经口腔传播，定植在对虾的消化道内，释放毒素，破坏肝胰脏的结构，引发肝胰脏的功能丧失。”

从事微生物研究的人员从所周知，副溶血弧菌有12种O抗原及59种K抗原，据其发酵糖类的情况可分为5个类型。各种弧菌对人和动物均有较强的毒力，其致病物质主要有分子量42000的致热性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH类似溶血毒(TRH)，具有溶血活性、肠毒素和致死作用。

无论感染噬菌体与否它都存在。即使副溶血弧菌不被噬菌体感染，它随着菌体的代谢，它同样在释放内外毒素。

噬菌机理

噬菌体颗粒感染一个细菌细胞后可迅速生成几百个子代噬菌体颗粒，每个子代颗粒又可感染细菌细胞，再生成几百个子代噬菌体颗粒。如此重复只需4次，一个噬菌体颗粒便可使几十亿个细菌感染而死亡。当把细菌涂布在培养基上，长成一层菌苔时，一个噬菌体感染其中一个细菌时，便会同上面所说的那样，把该细菌周围的成千上万个细菌感染致死，在培养基的菌苔上出现一个由于细菌被噬菌体裂解后造成的空斑，这便称为噬菌斑(plaque)。每一噬菌体除了能使宿主细菌裂解死亡外，还有一些噬菌体感染细菌后，并不使细胞死亡，称为溶原性噬菌体，这些噬菌体感染细菌后，将其自身的基因组整合进宿主细胞的基因组，此时，这种宿主细菌称为溶原性细菌。溶原性细菌内存在的整套噬菌体DNA基因组称为原噬菌体(prophage)，溶原性细菌不会产生许多子噬菌体颗粒，也不会裂解；但当条件改变使溶原周期终止时，宿主细胞就会因原噬菌体的增殖而裂解死亡，释放出许多子代噬菌体颗粒。

侵染过程

一个典型的噬菌体的侵染细菌的过程，可以分为三个阶段：感染阶段、增殖阶段和成熟阶段。

感染阶段：噬菌体侵染寄主细胞的第一步是“吸附”，即噬菌体的尾部附着在细菌的细胞壁上，然后进行“侵入”。噬菌体先通过溶菌酶的作用在细菌的细胞壁上打开一个缺口，尾鞘像肌动球蛋白的作用一样收缩，露出尾轴，伸入细胞壁内，如同注射器的注射动作，噬菌体只把头部的DNA注入细菌的细胞内，其蛋白质外壳留在壁外，不参与增殖过程。

增殖阶段：噬菌体DNA进入细菌细胞后，会引起一系列的变化：细菌的DNA合成停止，酶的合成也受到阻抑，噬菌体逐渐控制了细胞的代谢。噬菌体巧妙地利用寄主(细菌)细胞的“机器”，大量地复制子代噬菌体的DNA和蛋白质，并形成完整的噬菌体颗粒。噬菌体的形成是借助于细菌细胞的代谢机构，由本身的核酸物质操纵的。据观察，当噬菌体侵入细菌细胞后，细菌的细胞质里很快便充满了DNA细丝，十分钟左右开始出现完整的多角形头部结构。噬菌体成熟时，这些DNA高分子聚缩成多角体，头部蛋白质通过排列和结晶过程，把多角形DNA聚缩体包围，然后头部和尾部相互吻合，组装成一个完整的子代噬菌体。

成熟阶段：噬菌体成熟后，在潜伏后期，溶解寄主细胞壁的溶菌酶逐渐增加，促使细胞裂解，从而释放出子代噬菌体。在光学显微镜下观察培养的感染细胞，可以直接看到细胞的裂解现象。T2噬菌体在37 ℃下大约只需四十分就可以产生100-300个子代噬菌体。子代噬菌体释放出来后，又去侵染邻近的细菌细胞，产生子二代噬菌体。

三、微生物生态制剂在水产养殖中对弧菌病的防控作用

微生物生态制剂对养殖环境水体中的弧菌及水质控制方面有独特的优势。蛭弧菌、噬菌体对弧菌及其他有害细菌有显著的杀灭作用，可以有效地清除养殖环境水体中和对虾体内的副溶血性弧菌。乳酸菌它能产生酸性物质和代谢产物，不仅能强化对虾的消化吸收功能，增强食欲和促进生长，而且可抑制对虾消化道的副溶血弧菌的生长繁殖。芽孢杆菌在控制养虾池中发光细菌取得良好的效果。另外，光合细菌，EM菌，芽孢杆菌，硝化细菌等配合使用，在改变水和沉积微生物种群结构，消除或减少病原微生物的数量，改善水质等方面，对养殖水体环境会产生有益的影响。在对虾养殖过程中，不定期地使用微生物生态制剂，将有助于对虾优化消化道的菌群组成，对增强对虾食欲和预防消化道疾病均有良好的效果。

五、为什么蛭弧菌能有效的杀灭有害细菌  保护有益细菌

噬菌28的主要有效成分是经过特别筛选的蛭弧菌和噬菌体。蛭弧菌和噬菌体都具有共同的“寄生”和“裂解（杀灭）”宿主菌细胞的独特的生物学特性。但它们对宿主菌细胞的选择具有一定的特异性，尤其是噬菌体具有高度地特异性。而且它们作用于宿主菌细胞时，宿主菌细胞必须具有特定的受体，此时蛭弧菌和噬菌体才有可能在特定的受体某一位点吸附到宿主菌细胞表面，从而进一步感染、杀灭宿主菌细胞。

 在蛭弧菌和噬菌体的遗传物质转移中，把接受遗传物质的细菌称为受体菌。受体菌的细胞膜上和细胞内具有一类特殊的蛋白质，菌细胞受体能有选择性地和细胞外环境中一定的活性物质结合，从而引起细胞反应，如介导细胞间信号转导、细胞间黏合、细胞吞噬等过程。每一种菌细胞都有其独特的受体和信号转导系统，菌细胞对信号的反应不仅取决于其受体的特异性，而且与细胞的固有特征有关。

受体的功能：其一，是识别特异的信号物质——配体，识别的表现在于两者结合。配体，是指这样一些信号物质，除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何菌细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力（分子间力）的作用，随着两种分子空间结构互补程度增加，相互作用基团之间距离就会缩短，作用力就会大大增加，因此分子空间结构的互补性是特异结合的主要因素。同一配体可能有两种或两种以上的不同受体，同一配体与不同类型受体结合会产生不同的细胞反应。其二，把识别和接受的信号准确无误的放大并传递到菌细胞内部，启动一系列菌细胞内的生化反应，最后导致特定的细胞反应，使得胞间信号转换为胞内信号。 

受体，是存在于菌细胞膜、细胞浆或细胞核上的大分子化合物（如蛋白质、核酸、脂质等）能与特异性配体（药物、递质、激素、内源性活性物质）结合并产生效应。 

配体，与受体结合的特异性物质，如菌细胞。 

位点（受点），受体上能与配体相结合的活性基团。它能与受体结合，但不具备内在活性。基因在染色体上占有的特定位置叫基因位点。

菌种是微生物生态制剂质量控制的源头，是产量、质量和效果的重中之重。其菌种必须是具有特定的生态效应和生物学性状稳定的特定菌株，是由国家法定的菌种保藏管理机构经过严格分类、鉴定的。即使是这样的菌种，每年还必须鉴定1次，确认其原有的生物学性状没有发生改变才能使用。自行分离、鉴定，未经过国家菌种保藏管理机构鉴定确认的菌种，是不能用于微生物生态制剂生产的。

所有生物物种都是会发生变异的，变异的细菌有可能发生超常的致病性而给人类造成灾难。所以，我们噬菌28的生产用菌种是经过严格筛选的。

我们具体做法和步骤如下：在确定噬菌28微生物生态制剂生产菌种前，必须用10株以上的蛭弧菌、噬菌体对我国农业部允许使用的乳杆菌、链球菌、芽孢杆菌、酵母、假单胞菌等16个菌株和10株以上的水生物常见的致病菌，如副溶血弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、海豚链球菌、嗜水气单胞菌、假单胞菌等做交叉裂解试验 。选育出对水生动物常见的致病菌有较强的裂解能力、对农业部允许使用的16个菌株不裂解的蛭弧菌和噬菌体菌种作为生产菌种。

因为每一种菌细胞都有其独特的受体和信号转导系统，菌细胞对信号的反应不仅取决于其受体的特异性，而且与细胞的固有特征有关。我国农业部允许使用的乳杆菌、链球菌、芽孢杆菌、酵母、假单胞菌等16个菌株和10株以上的水生物常见的致病菌，如副溶血弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、海豚链球菌、嗜水气单胞菌、假单胞菌等它们存在于菌细胞膜、细胞浆或细胞核上物质很少有完全相同的，受体和信号转导系统都各自有其独特性。也就是说，我国农业部批准使用的微生物生态制剂菌株，是不可能与目前水生物常见的菌的受体位点相同，我们利用这一特殊的生物学特性和完善的生物学方法，就不难做到我们的噬菌28微生物生态制剂中的主要成分蛭弧菌和噬菌体的生产用菌（毒）株，在有效的杀灭有害细菌的同时，又能有效的保证有益菌株不被破坏。

六、蛭弧菌微生物生态制剂在什么阶段使用比较好

微生物生态制剂起效慢，所以我们主张预防为主，效果比治疗效果要好。蛭弧菌微生物生态制剂有五个效应最佳期。

一是虾蟹幼体在开食时期，使用蛭弧菌微生物生态制剂既可以使蛭弧菌在肠壁附着起到屏障作用，又可改善消化道环境，促进摄食与生长，增强抗病能力。

二是在虾蟹的快速生长期，使用蛭弧菌微生物生态制剂既能清除养殖环境中的有害细菌，又能消灭体内的有害细菌，使虾蟹健康生长，减少发病率。

三是在虾蟹饵料转换期使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以使虾蟹安全度过转换期，避免致病菌的侵袭。

四是在虾蟹发病经抗生素治疗后使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以帮助虾蟹尽快恢复体质，起到明显的保健作用。

五是当虾蟹处在应激状态下使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以起到镇静作用，减少虾蟹因应激过度而死亡，提高成活率，特别是能减少台风暴雨对虾蟹的强烈应激影响。

实践证明，抓住这五个效应最佳期，科学使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以取得比较理想的防病治病效果。

早期用，能够使池塘水体保持良好的生态环境，维持水体的生态相对平衡，提高苗种的成活率和鱼虾的生长速度。一旦发病后再用，效果就不如预防。

如果早期坚持连续使用3-4次，塘水就会相对稳定，基本上没有细菌病的发生。所以前期把疾病控制好，鱼虾才会生长快。如果用的是抗生素，它会抑制鱼虾的生长。用蛭弧菌或其他微生态制剂是不会这样的。蛭弧菌微生物生态制剂还有一个作用就是对蓝藻有抑制作用。

最后，建议购买使用微生物生态制剂时，一定要选择用大厂的、管理比较规范的企业的品牌产品。

七、噬菌28系列产品使用特别注意事项

1、使用噬菌28系列产品时，先用20倍以上本糖水稀释，然后均匀泼洒到养殖水体中。

2、噬菌28不能和糖、氨基酸、中草药、消毒剂、杀虫剂、抗菌剂、化学性增氧剂等混合在一起泼洒。但泼洒噬菌28以后2时就可以泼洒上述药物，或泼洒上述药物2时以后再泼洒噬菌28。

3、噬菌28在pH3.0-9.8的水体中均有杀菌效果，而pH7.0-7.6最好。pH在6.0或以下和pH8.5或以上时，效果下降一半。建议使用前先测pH，如pH小于6.0，或大于8.5时用量加倍，也可以将pH调到7.0—7.6后再用。

4、水体中汞、铅、镉、砷等重金属会影响噬菌28使用效果。可用检测氨氮的奈氏试剂检测水中的重金属含量。如果过高，就先用乙二胺四乙酸二钠降低后再用噬菌28。

5、水体中亚硝酸盐，氨气，硫化氢，甲烷，农药，石油类等有毒物质也会影响噬菌28的使用效果。

6、噬菌28在水温4-37℃时均有杀菌效果。但水温在26℃时杀菌力最强。在正常情况下，水温10℃以下七天见效果，10-15℃时5天见效果，15-20℃是三天见效果，20-25℃时2天见效果，25-30℃1天见效果。

7、噬菌28在盐度0.5-30时均有杀菌效果。盐度在5或以下时可用淡水专用型渔人得利。盐度在5以上时可用海水专用型海特灵。

8、噬菌28与五联芽胞王等芽孢杆菌类产品合用时净水效果更好，与光合细菌原粉合用，可调节水体重金属含量，与亚消安泰合用时，对亚硝酸盐、氨气、硫化氢、甲烷，农药，石油类等有毒物质有分解作用。

9、噬菌28以防御为主，建议水生动物在未发病前15天用一次，内服外泼同时进行。如出现单纯细菌病可用于治疗，用量是预防量的2倍。对病毒、寄生虫引起的疾病噬菌28不能达到理想效果。

10、要坚持在养殖过程中全程使用噬菌28，偶尔使用一两次不易达到理想效果。在使用噬菌28的同时，肥水、调水、抗应激等药物应同时使用。

11、判断噬菌28的使用效果要从以下几个方面看①对水生动物细菌病的防治效果；②对水体净化的作用；③提高水生物的抗病能力和活力；④提高水生物的存活率和养殖成功率；⑤提高水生动物的摄食量，促进水生物的生长；⑥提供的是绿色安全食品；⑥水体生态环境不受破坏。

12、噬菌28系列产品有兼性耗氧和耗氧产品之分，要严格按说明书使用，兼性耗氧产品在阴雨天或夜晚只要水体不缺氧都可以使用。耗氧产品应在晴天上午十点使用为宜，如同时增氧更好。

13、噬菌28系列蛭弧菌类产品生产工艺特殊，国家标准规定蛭弧菌生态制剂必定是透明没有特殊味道的液体。如果有其他颜色、或特别气味、或其他形状的的蛭弧菌产品均为假冒伪劣。

14、噬菌28系列产品 4℃保存，液体最长可存活12个月，粉剂24个月。

八、蛭弧菌微生物生态制剂的效果是肯定的  特别是在对虾养殖上

确切地说各类微生物生态制剂，无论是蛭弧菌微生物生态制剂还是芽孢杆菌微生物生态制剂，在任何水产养殖品种上都有相当不错的效果。但微生物生态制剂生产用的菌种很重要，好的菌种效果达70%以上。由于养虾的附加值比较高，所以养殖户更乐意把产品使用在对虾上，但不能说明用在鱼上效果就不好。

只要是由致病菌引起的细菌病，我们的蛭弧菌微生物生态制剂产品都是有相当不错的防治效果的，但其他厂家产品我不敢说。经常有人会反映蛭弧菌微生物生态制剂在有些地区用得不错，而在有些地区效果却不是很好。这可能因为是流行的主流菌群不一样。今年可能流行病的主流菌群是副溶血弧菌，明年则可能是鳗弧菌或是嗜水气单胞菌。不同的地方流行病致病菌也不尽相同，所以效果会不一样。这样就让人产生一种错觉。因此要指导他们正确使用很重要。

九、微生物生态制剂处于一个推广阶段，不是所有人都可以接受，养殖户有的非常的相信，也有觉得使用微生物生态制剂有还是会有许多风险。

蛭弧菌微生物生态制剂在应用上是刚起步，连初级阶段也谈不上，不管是水产还是畜牧。首先，因为蛭弧菌到现在为止，没有多少人真正了解它。他们仅仅从表面上看出它有效果，但更深的东西就不知道。其次，我国在微生物生态制剂的管理上不规范。什么样的人都可以生产，门槛低，因此在产品的推广、生产上都很乱。再者，微生物生态制剂生产用的菌种分类、鉴定制度不完善。微生物生态制剂的使用方法也是很重要的，不是拿来就可以用的。什么时候用，用到怎样的程度，都是有讲究的。

使用蛭弧菌微生物生态制剂一定要注意一下几个方面：1、实施预防为主、防治结合、适时使用。2、种群促进、优势互补、配伍使用。蛭弧菌微生物生态制剂和其他微生物生态制剂配伍使用，可以有效地维持生态平衡，改善养殖水体，提高水产品的抗病能力。3、依据规律、对症下药、及时使用。通常水产品养殖一年有两个发病高峰期，一是5、6月份幼体发病高峰期；二是7、8、9月份高温发病期。因而，一定要根据发病的原因、流行的规律及发病高峰期，抓住关键对症下药，充分发挥蛭弧菌微生物生态制剂的防病治病功能。4、根据水质变化、 合理使用。

我们要不断的总结和完善。只有这样才算是进入初级阶段。

十、市场上蛭弧菌微生物生态制剂越来越多鱼目混珠  如何判断蛭弧菌的真假

在当前我国现有的研发水平和生产设备，蛭弧菌微生物生态制剂成品大部分都是液体。蛭弧菌产品做成粉剂，对设备的要求非常高，投入也很大，目前国内很少有厂家能够做到。

1987年我就在实验室用血清做赋型剂成功的冻干出蛭弧菌粉剂，并在中华微生物学和免疫学杂志公开发表过。但要批量生产蛭弧菌微生物生态制剂粉剂比较难的，技术要求高。一是因为蛭弧菌微生物生态制剂要做成粉剂，必须要冻干，不可以喷雾干燥，更不可以烘干。因为蛭弧菌对热比较敏感。即使非常成功地冻干蛭弧菌微生物生态制剂，但蛭弧菌活菌含量不会超过70%。如果要烘干的话，蛭弧菌是不可能成活的。二是如果要冻干蛭弧菌微生物生态制剂粉剂，必须要将大量的发酵液上百倍的超滤浓缩，否则就无法实施冻干。目前我国的冻干技术和设备是过关的，但超滤浓缩的技术和设备却不过关。如从美国进口这样的成套设备，1997年前的价格是120万美金。

现在国内各种蛭弧菌形态结构的图片均是出自我这里，均是我提供的。蛭弧菌在普通光学显微镜下是看不到的，必须要在位相差显微镜下才行。国家科技部、农业部、知识产权局等有关部门批准的所有证件也都是授予我的。

蛭弧菌是不会耗氧的，也不会产气，所以包装瓶是不会涨起来或是扁壁的。如果包装瓶涨起来或是扁壁的，那它就不是蛭弧菌微生物生态制剂。事实上，蛭弧菌微生物生态制剂是可以鉴别的，但它要求的设备高、成本高、检测要求也高。然而，它可以通过视觉和嗅觉从表面观察到。蛭弧菌生长过程中不能利用人工合成培养中，所以蛭弧菌微生物生态制剂只能是半透明、浑浊的、蛋白质淡淡的香味的液体（因为里面含有菌体）。

十一、为什么养殖水体弧菌检测有时多有时少？

主要有以下原因，造成养殖水体的弧菌检测结果的判定不可能准确，更不能作为是否要用药的依据。

1、检测弧菌的试剂盒不稳定：

现在市场上销售的弧菌检测试剂盒（平板）良莠不齐，质量很不稳定。如抑制剂的添加量就会影响弧菌菌落的形成数量，抑制剂量大些菌落数量就会形成的少，反之抑制剂量小些菌落数量就会形成的多。再者，许多厂家生产的检测弧菌的试剂盒杂菌和霉菌丛生。

2、取水样方法不规范：

水样检测应取水下20公分的水，而且应该多点、分层取样，不能在一个地方一次性灌满一瓶水。取水样的点应相对固定，不能这次在虾塘南边取水，下次又在虾塘北边取水。更不能这次取这个塘的水，下次取另一个塘的水。

3、检验用水样不准确：

吸管取水样操作不当误差很大，有经验的专职检验人员用吸管取样是有标准和要求的，如手持吸管角度应为45度。以1毫升吸管为例如，45度角1点水是0.025毫升,15度角1点水是0.04毫升, 90度角1点水是0.015毫升。另外厂家提供的塑料吸管是不规范的也是不符合标准的，误差更大。

4、取水样用瓶子本身有细菌：

取样的瓶子应该严格消毒，如果没有彻底消毒的瓶子本身就有细菌，这样就无法说清楚检测出的细菌是水体里的还是瓶子里的细菌。虾农往往随手拿个矿泉水瓶子或者拿个饮料瓶去取水，这个检测就没有任何意义。

5、培养条件不一致：

弧菌培养要求温度是37℃，如果不是在恒温培养箱用37℃培养，在室温环境培养，由于室温温差的原因必定严重影响弧菌菌落形成的数量。

6、弧菌无法鉴定：

在市场上销售的弧菌检测试剂盒检出菌落只能说是细菌，不能说肯定就是弧菌。因为抑制性再强的培养基也会有杂菌菌落的形成。没有经过相关鉴定，就不能说在市场上销售的弧菌检测试剂盒检出的菌落就说是弧菌，即使就是弧菌，也无法判定是不是引起虾发病或者死亡的弧菌。因为水体中有许多不致病的弧菌。

鉴于上述众多原因，我认为现在市场上销售的弧菌检测试剂盒用于弧菌检测完全是一种商业行为，根本不可能为虾农解决什么问题。虾农的所谓弧菌检测也是一种心理安慰。弧菌检测不能用于判定是否要用药的依据。反之，如果能严格控制上述6个方面的因素，那么弧菌检测才是有意义的。

十二、乳酸菌不能阻断水产养殖中弧菌的生长繁殖

最近在水产药品销售市场流传一种奇谈怪论：乳酸菌能阻断水产养殖水体及水生物弧菌的生长繁殖！这纯粹是某些水产药品生产销售不法厂商，针对目前水产养殖弧菌病多发和流行的现象散布谬论、误导消费者。本人就乳酸菌的种类、 功能特征、 作用原理、在水产养殖中的应用等综述如下，供大家讨论、以正视听。

乳酸菌是发酵糖类且主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。乳酸菌是一群相当庞杂的细菌，目前至少可分为18个属，共有200多种。

1、种类

虽然乳酸菌的属性和种类很多，但从它的产生来源我们仍可以很清晰的把乳酸菌分为两大类：

（1）动物源乳酸菌

取自动物，因菌种常处于相对不稳定状态，其生物功效也较不稳定，且在大量食用时，很容易导致人体动物蛋白过敏，即排斥反应。

（2）植物源乳酸菌

因为取自植物易被人体吸收，不论摄取多大的量，人体不会产生异体蛋白排斥反应，且植物源乳酸菌比动物源者更具有活力，能比动物源多8倍的数量到达人体小肠内定植，从而发挥其强大而稳定的生物功效。

5000年前人类就已经在使用乳酸菌，并不是现代人的发现。

2、功能特征

一株好的乳酸菌菌种生产的微生态制剂在水产养殖应用，主要功能是：改变水生物肠道菌群的构成，改善胃肠道功能，维持肠道内菌群平衡，形成抗菌生物屏障。但绝对没有，也不可能有阻断弧菌生长繁殖的作用。

什么叫阻断？由于某一物质阻止而中断（某事的）进程或进展叫做阻断。

什么是阻断药物？阻断药物是指病毒在转录过程中起主导作用的底物或竞争性抑制药，从而阻止病毒复制的药物。这类药物主要分为以下5 类。 ( 1 )核昔类。主要治疗免疫缺陷病 及其相关综合征，有严重的不良反应，需长期或终身用药。 ( 2 )非核营类逆转录酶抑制药。该药可与其他抗病毒药合用治疗病毒感染。 ( 3 )蛋白酶抑制药。该类药物与核昔类联用可有效地抑制病毒复制，并减少不良反应。 ( 4 )侵入抑制药。本类药物以干扰病毒与宿主细胞的粘附融合而达到抗病毒的作用。 ( 5 )整合酶抑制药。这类药物抑制整合酶对病毒基因与宿主细胞基因的整合作用。

目前无论用于人体还是动物阻断治疗的药物很少，而且用于阻断治疗的药物都是用于病毒，而不是细菌。用于阻断细菌DNA合成的药物均为抗生素。而乳酸菌及其代谢产物绝没有阻断养殖水体或水产品中弧菌生长繁殖的作用！

3、作用原理

乳酸菌在水生动物体内能发挥作用的原理就是生物拮抗，没有阻断弧菌生长繁殖的功能。

什么叫生物拮抗？生物拮抗是指微生物之间的互相抵制、互相排斥、互相竞争生存空间和条件、甚至互相残杀的斗争。一个安定的、处于生物平衡的正常微生物群，对养殖水体和水产品中外籍菌有明显的生物拮抗作用。导致生物拮抗的原因，是微生物及其产生的多种分泌物质的作用，其中厌氧菌起着重大作用。

生物拮抗大致有以下几种形式：

（1）改变养殖水体及水生物微环境。细菌生长过程产生的有机酸降低了养殖水体及水生物环境中的pH值，抑制了外籍菌，促进肠蠕动，清除外籍菌。

（2）占位。细菌与水生物黏膜上皮细胞紧密结合形成“占位”性保护（生物屏障），从而排斥外籍菌。

（3）营养争夺。由于厌氧菌（多数是有益菌）在其特定的水生物环境内数量很大，在与外籍菌的营养争夺上处于优势，从而限制了外籍菌的生长繁殖。

（4）分泌抗菌物质。在生物发酵过程中微生物产生的抗菌物质的作用至关重要，对外籍菌具有强大的抑制力、杀伤力。

（5）免疫作用。正常微生物群与宿主的免疫力配合，也可产生很有效的生物拮抗。

 4、乳酸菌在水产养殖中的应用

 乳酸菌是被人类作为食品微生物利用的一大类菌，尤其在增强牛奶保健功能、提高青贮品质、提高畜禽生产性能、降低畜产品贮藏对肉品风味的影响等方面已取得较好效果，广泛应用于食品、医药、轻工业和畜牧业等领域。

目前在水产上对乳酸菌的报道主要集中于乳酸菌在水产动物肠胃和其他内脏器官中的栖息情况。乳酸菌在水产养殖上的应用较多，主要是拌入饲料一起投喂给水生物动物，或做为EM菌的主导菌在水体泼洒。

向养殖水体投放乳酸菌改良养殖水体环境，抑制水体中有害菌的繁殖生长，调节藻相平衡，控制有害菌藻。

5、乳酸菌能否阻断养殖水体或水生物中弧菌的生长

无论从乳酸菌功能特征，还是作用原理都证明：乳酸菌不能阻断养殖水体或水生物中弧菌的生长繁殖。一些不法厂家，针对目前水产养殖弧菌病多发和流行的现象，为了获得更多的商业利润，散布谬论、误导消费者。这种不负责任的夸大其词过度的宣传乳酸菌的作用，其用心何在？于心何忍？

2、副溶血性弧菌有侵袭性，对虾在脱壳时，通过虾体破口侵入虾体引起软组织感染或经血液循环（败血症）播散至肝胰脏等组织而引起坏死性感染。

（四）噬菌体裂解副溶血弧菌与毒素

美国Lightner教授认为EMS的病原是副溶血弧菌的特异变种，被噬菌体感染后发生变异，并促使细菌释放强力的毒素。泰国养虾届教父级人物暨泰国农业大学Chalor 认为，教授说：“EMS” 早期死亡综合症”（EarlyMortalitySyndrome）是有一种普通的细菌感染所致，该细菌是副溶血弧菌，被一种噬菌体（病毒）感染后可释放出强烈的毒素。它由经口腔传播，定植在对虾的消化道内，释放毒素，破坏肝胰脏的结构，引发肝胰脏的功能丧失。”

从事微生物研究的人员从所周知，副溶血弧菌有12种O抗原及59种K抗原，据其发酵糖类的情况可分为5个类型。各种弧菌对人和动物均有较强的毒力，其致病物质主要有分子量42000的致热性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH类似溶血毒(TRH)，具有溶血活性、肠毒素和致死作用。

无论感染噬菌体与否它都存在。即使副溶血弧菌不被噬菌体感染，它随着菌体的代谢，它同样在释放内外毒素。

噬菌机理

噬菌体颗粒感染一个细菌细胞后可迅速生成几百个子代噬菌体颗粒，每个子代颗粒又可感染细菌细胞，再生成几百个子代噬菌体颗粒。如此重复只需4次，一个噬菌体颗粒便可使几十亿个细菌感染而死亡。当把细菌涂布在培养基上，长成一层菌苔时，一个噬菌体感染其中一个细菌时，便会同上面所说的那样，把该细菌周围的成千上万个细菌感染致死，在培养基的菌苔上出现一个由于细菌被噬菌体裂解后造成的空斑，这便称为噬菌斑(plaque)。每一噬菌体除了能使宿主细菌裂解死亡外，还有一些噬菌体感染细菌后，并不使细胞死亡，称为溶原性噬菌体，这些噬菌体感染细菌后，将其自身的基因组整合进宿主细胞的基因组，此时，这种宿主细菌称为溶原性细菌。溶原性细菌内存在的整套噬菌体DNA基因组称为原噬菌体(prophage)，溶原性细菌不会产生许多子噬菌体颗粒，也不会裂解；但当条件改变使溶原周期终止时，宿主细胞就会因原噬菌体的增殖而裂解死亡，释放出许多子代噬菌体颗粒。

侵染过程

一个典型的噬菌体的侵染细菌的过程，可以分为三个阶段：感染阶段、增殖阶段和成熟阶段。

感染阶段：噬菌体侵染寄主细胞的第一步是“吸附”，即噬菌体的尾部附着在细菌的细胞壁上，然后进行“侵入”。噬菌体先通过溶菌酶的作用在细菌的细胞壁上打开一个缺口，尾鞘像肌动球蛋白的作用一样收缩，露出尾轴，伸入细胞壁内，如同注射器的注射动作，噬菌体只把头部的DNA注入细菌的细胞内，其蛋白质外壳留在壁外，不参与增殖过程。

增殖阶段：噬菌体DNA进入细菌细胞后，会引起一系列的变化：细菌的DNA合成停止，酶的合成也受到阻抑，噬菌体逐渐控制了细胞的代谢。噬菌体巧妙地利用寄主(细菌)细胞的“机器”，大量地复制子代噬菌体的DNA和蛋白质，并形成完整的噬菌体颗粒。噬菌体的形成是借助于细菌细胞的代谢机构，由本身的核酸物质操纵的。据观察，当噬菌体侵入细菌细胞后，细菌的细胞质里很快便充满了DNA细丝，十分钟左右开始出现完整的多角形头部结构。噬菌体成熟时，这些DNA高分子聚缩成多角体，头部蛋白质通过排列和结晶过程，把多角形DNA聚缩体包围，然后头部和尾部相互吻合，组装成一个完整的子代噬菌体。

成熟阶段：噬菌体成熟后，在潜伏后期，溶解寄主细胞壁的溶菌酶逐渐增加，促使细胞裂解，从而释放出子代噬菌体。在光学显微镜下观察培养的感染细胞，可以直接看到细胞的裂解现象。T2噬菌体在37 ℃下大约只需四十分就可以产生100-300个子代噬菌体。子代噬菌体释放出来后，又去侵染邻近的细菌细胞，产生子二代噬菌体。

三、微生物生态制剂在水产养殖中对弧菌病的防控作用

微生物生态制剂对养殖环境水体中的弧菌及水质控制方面有独特的优势。蛭弧菌、噬菌体对弧菌及其他有害细菌有显著的杀灭作用，可以有效地清除养殖环境水体中和对虾体内的副溶血性弧菌。乳酸菌它能产生酸性物质和代谢产物，不仅能强化对虾的消化吸收功能，增强食欲和促进生长，而且可抑制对虾消化道的副溶血弧菌的生长繁殖。芽孢杆菌在控制养虾池中发光细菌取得良好的效果。另外，光合细菌，EM菌，芽孢杆菌，硝化细菌等配合使用，在改变水和沉积微生物种群结构，消除或减少病原微生物的数量，改善水质等方面，对养殖水体环境会产生有益的影响。在对虾养殖过程中，不定期地使用微生物生态制剂，将有助于对虾优化消化道的菌群组成，对增强对虾食欲和预防消化道疾病均有良好的效果。

五、为什么蛭弧菌能有效的杀灭有害细菌  保护有益细菌

噬菌28的主要有效成分是经过特别筛选的蛭弧菌和噬菌体。蛭弧菌和噬菌体都具有共同的“寄生”和“裂解（杀灭）”宿主菌细胞的独特的生物学特性。但它们对宿主菌细胞的选择具有一定的特异性，尤其是噬菌体具有高度地特异性。而且它们作用于宿主菌细胞时，宿主菌细胞必须具有特定的受体，此时蛭弧菌和噬菌体才有可能在特定的受体某一位点吸附到宿主菌细胞表面，从而进一步感染、杀灭宿主菌细胞。

 在蛭弧菌和噬菌体的遗传物质转移中，把接受遗传物质的细菌称为受体菌。受体菌的细胞膜上和细胞内具有一类特殊的蛋白质，菌细胞受体能有选择性地和细胞外环境中一定的活性物质结合，从而引起细胞反应，如介导细胞间信号转导、细胞间黏合、细胞吞噬等过程。每一种菌细胞都有其独特的受体和信号转导系统，菌细胞对信号的反应不仅取决于其受体的特异性，而且与细胞的固有特征有关。

受体的功能：其一，是识别特异的信号物质——配体，识别的表现在于两者结合。配体，是指这样一些信号物质，除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何菌细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力（分子间力）的作用，随着两种分子空间结构互补程度增加，相互作用基团之间距离就会缩短，作用力就会大大增加，因此分子空间结构的互补性是特异结合的主要因素。同一配体可能有两种或两种以上的不同受体，同一配体与不同类型受体结合会产生不同的细胞反应。其二，把识别和接受的信号准确无误的放大并传递到菌细胞内部，启动一系列菌细胞内的生化反应，最后导致特定的细胞反应，使得胞间信号转换为胞内信号。 

受体，是存在于菌细胞膜、细胞浆或细胞核上的大分子化合物（如蛋白质、核酸、脂质等）能与特异性配体（药物、递质、激素、内源性活性物质）结合并产生效应。 

配体，与受体结合的特异性物质，如菌细胞。 

位点（受点），受体上能与配体相结合的活性基团。它能与受体结合，但不具备内在活性。基因在染色体上占有的特定位置叫基因位点。

菌种是微生物生态制剂质量控制的源头，是产量、质量和效果的重中之重。其菌种必须是具有特定的生态效应和生物学性状稳定的特定菌株，是由国家法定的菌种保藏管理机构经过严格分类、鉴定的。即使是这样的菌种，每年还必须鉴定1次，确认其原有的生物学性状没有发生改变才能使用。自行分离、鉴定，未经过国家菌种保藏管理机构鉴定确认的菌种，是不能用于微生物生态制剂生产的。

所有生物物种都是会发生变异的，变异的细菌有可能发生超常的致病性而给人类造成灾难。所以，我们噬菌28的生产用菌种是经过严格筛选的。

我们具体做法和步骤如下：在确定噬菌28微生物生态制剂生产菌种前，必须用10株以上的蛭弧菌、噬菌体对我国农业部允许使用的乳杆菌、链球菌、芽孢杆菌、酵母、假单胞菌等16个菌株和10株以上的水生物常见的致病菌，如副溶血弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、海豚链球菌、嗜水气单胞菌、假单胞菌等做交叉裂解试验 。选育出对水生动物常见的致病菌有较强的裂解能力、对农业部允许使用的16个菌株不裂解的蛭弧菌和噬菌体菌种作为生产菌种。

因为每一种菌细胞都有其独特的受体和信号转导系统，菌细胞对信号的反应不仅取决于其受体的特异性，而且与细胞的固有特征有关。我国农业部允许使用的乳杆菌、链球菌、芽孢杆菌、酵母、假单胞菌等16个菌株和10株以上的水生物常见的致病菌，如副溶血弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、海豚链球菌、嗜水气单胞菌、假单胞菌等它们存在于菌细胞膜、细胞浆或细胞核上物质很少有完全相同的，受体和信号转导系统都各自有其独特性。也就是说，我国农业部批准使用的微生物生态制剂菌株，是不可能与目前水生物常见的菌的受体位点相同，我们利用这一特殊的生物学特性和完善的生物学方法，就不难做到我们的噬菌28微生物生态制剂中的主要成分蛭弧菌和噬菌体的生产用菌（毒）株，在有效的杀灭有害细菌的同时，又能有效的保证有益菌株不被破坏。

六、蛭弧菌微生物生态制剂在什么阶段使用比较好

微生物生态制剂起效慢，所以我们主张预防为主，效果比治疗效果要好。蛭弧菌微生物生态制剂有五个效应最佳期。

一是虾蟹幼体在开食时期，使用蛭弧菌微生物生态制剂既可以使蛭弧菌在肠壁附着起到屏障作用，又可改善消化道环境，促进摄食与生长，增强抗病能力。

二是在虾蟹的快速生长期，使用蛭弧菌微生物生态制剂既能清除养殖环境中的有害细菌，又能消灭体内的有害细菌，使虾蟹健康生长，减少发病率。

三是在虾蟹饵料转换期使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以使虾蟹安全度过转换期，避免致病菌的侵袭。

四是在虾蟹发病经抗生素治疗后使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以帮助虾蟹尽快恢复体质，起到明显的保健作用。

五是当虾蟹处在应激状态下使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以起到镇静作用，减少虾蟹因应激过度而死亡，提高成活率，特别是能减少台风暴雨对虾蟹的强烈应激影响。

实践证明，抓住这五个效应最佳期，科学使用蛭弧菌微生物生态制剂，可以取得比较理想的防病治病效果。

早期用，能够使池塘水体保持良好的生态环境，维持水体的生态相对平衡，提高苗种的成活率和鱼虾的生长速度。一旦发病后再用，效果就不如预防。

如果早期坚持连续使用3-4次，塘水就会相对稳定，基本上没有细菌病的发生。所以前期把疾病控制好，鱼虾才会生长快。如果用的是抗生素，它会抑制鱼虾的生长。用蛭弧菌或其他微生态制剂是不会这样的。蛭弧菌微生物生态制剂还有一个作用就是对蓝藻有抑制作用。

最后，建议购买使用微生物生态制剂时，一定要选择用大厂的、管理比较规范的企业的品牌产品。

七、噬菌28系列产品使用特别注意事项

1、使用噬菌28系列产品时，先用20倍以上本糖水稀释，然后均匀泼洒到养殖水体中。

2、噬菌28不能和糖、氨基酸、中草药、消毒剂、杀虫剂、抗菌剂、化学性增氧剂等混合在一起泼洒。但泼洒噬菌28以后2时就可以泼洒上述药物，或泼洒上述药物2时以后再泼洒噬菌28。

3、噬菌28在pH3.0-9.8的水体中均有杀菌效果，而pH7.0-7.6最好。pH在6.0或以下和pH8.5或以上时，效果下降一半。建议使用前先测pH，如pH小于6.0，或大于8.5时用量加倍，也可以将pH调到7.0—7.6后再用。

4、水体中汞、铅、镉、砷等重金属会影响噬菌28使用效果。可用检测氨氮的奈氏试剂检测水中的重金属含量。如果过高，就先用乙二胺四乙酸二钠降低后再用噬菌28。

5、水体中亚硝酸盐，氨气，硫化氢，甲烷，农药，石油类等有毒物质也会影响噬菌28的使用效果。

6、噬菌28在水温4-37℃时均有杀菌效果。但水温在26℃时杀菌力最强。在正常情况下，水温10℃以下七天见效果，10-15℃时5天见效果，15-20℃是三天见效果，20-25℃时2天见效果，25-30℃1天见效果。

7、噬菌28在盐度0.5-30时均有杀菌效果。盐度在5或以下时可用淡水专用型渔人得利。盐度在5以上时可用海水专用型海特灵。

8、噬菌28与五联芽胞王等芽孢杆菌类产品合用时净水效果更好，与光合细菌原粉合用，可调节水体重金属含量，与亚消安泰合用时，对亚硝酸盐、氨气、硫化氢、甲烷，农药，石油类等有毒物质有分解作用。

9、噬菌28以防御为主，建议水生动物在未发病前15天用一次，内服外泼同时进行。如出现单纯细菌病可用于治疗，用量是预防量的2倍。对病毒、寄生虫引起的疾病噬菌28不能达到理想效果。

10、要坚持在养殖过程中全程使用噬菌28，偶尔使用一两次不易达到理想效果。在使用噬菌28的同时，肥水、调水、抗应激等药物应同时使用。

11、判断噬菌28的使用效果要从以下几个方面看①对水生动物细菌病的防治效果；②对水体净化的作用；③提高水生物的抗病能力和活力；④提高水生物的存活率和养殖成功率；⑤提高水生动物的摄食量，促进水生物的生长；⑥提供的是绿色安全食品；⑥水体生态环境不受破坏。

12、噬菌28系列产品有兼性耗氧和耗氧产品之分，要严格按说明书使用，兼性耗氧产品在阴雨天或夜晚只要水体不缺氧都可以使用。耗氧产品应在晴天上午十点使用为宜，如同时增氧更好。

13、噬菌28系列蛭弧菌类产品生产工艺特殊，国家标准规定蛭弧菌生态制剂必定是透明没有特殊味道的液体。如果有其他颜色、或特别气味、或其他形状的的蛭弧菌产品均为假冒伪劣。

14、噬菌28系列产品 4℃保存，液体最长可存活12个月，粉剂24个月。

八、蛭弧菌微生物生态制剂的效果是肯定的  特别是在对虾养殖上

确切地说各类微生物生态制剂，无论是蛭弧菌微生物生态制剂还是芽孢杆菌微生物生态制剂，在任何水产养殖品种上都有相当不错的效果。但微生物生态制剂生产用的菌种很重要，好的菌种效果达70%以上。由于养虾的附加值比较高，所以养殖户更乐意把产品使用在对虾上，但不能说明用在鱼上效果就不好。

只要是由致病菌引起的细菌病，我们的蛭弧菌微生物生态制剂产品都是有相当不错的防治效果的，但其他厂家产品我不敢说。经常有人会反映蛭弧菌微生物生态制剂在有些地区用得不错，而在有些地区效果却不是很好。这可能因为是流行的主流菌群不一样。今年可能流行病的主流菌群是副溶血弧菌，明年则可能是鳗弧菌或是嗜水气单胞菌。不同的地方流行病致病菌也不尽相同，所以效果会不一样。这样就让人产生一种错觉。因此要指导他们正确使用很重要。

九、微生物生态制剂处于一个推广阶段，不是所有人都可以接受，养殖户有的非常的相信，也有觉得使用微生物生态制剂有还是会有许多风险。

蛭弧菌微生物生态制剂在应用上是刚起步，连初级阶段也谈不上，不管是水产还是畜牧。首先，因为蛭弧菌到现在为止，没有多少人真正了解它。他们仅仅从表面上看出它有效果，但更深的东西就不知道。其次，我国在微生物生态制剂的管理上不规范。什么样的人都可以生产，门槛低，因此在产品的推广、生产上都很乱。再者，微生物生态制剂生产用的菌种分类、鉴定制度不完善。微生物生态制剂的使用方法也是很重要的，不是拿来就可以用的。什么时候用，用到怎样的程度，都是有讲究的。

使用蛭弧菌微生物生态制剂一定要注意一下几个方面：1、实施预防为主、防治结合、适时使用。2、种群促进、优势互补、配伍使用。蛭弧菌微生物生态制剂和其他微生物生态制剂配伍使用，可以有效地维持生态平衡，改善养殖水体，提高水产品的抗病能力。3、依据规律、对症下药、及时使用。通常水产品养殖一年有两个发病高峰期，一是5、6月份幼体发病高峰期；二是7、8、9月份高温发病期。因而，一定要根据发病的原因、流行的规律及发病高峰期，抓住关键对症下药，充分发挥蛭弧菌微生物生态制剂的防病治病功能。4、根据水质变化、 合理使用。

我们要不断的总结和完善。只有这样才算是进入初级阶段。

十、市场上蛭弧菌微生物生态制剂越来越多鱼目混珠  如何判断蛭弧菌的真假

在当前我国现有的研发水平和生产设备，蛭弧菌微生物生态制剂成品大部分都是液体。蛭弧菌产品做成粉剂，对设备的要求非常高，投入也很大，目前国内很少有厂家能够做到。

1987年我就在实验室用血清做赋型剂成功的冻干出蛭弧菌粉剂，并在中华微生物学和免疫学杂志公开发表过。但要批量生产蛭弧菌微生物生态制剂粉剂比较难的，技术要求高。一是因为蛭弧菌微生物生态制剂要做成粉剂，必须要冻干，不可以喷雾干燥，更不可以烘干。因为蛭弧菌对热比较敏感。即使非常成功地冻干蛭弧菌微生物生态制剂，但蛭弧菌活菌含量不会超过70%。如果要烘干的话，蛭弧菌是不可能成活的。二是如果要冻干蛭弧菌微生物生态制剂粉剂，必须要将大量的发酵液上百倍的超滤浓缩，否则就无法实施冻干。目前我国的冻干技术和设备是过关的，但超滤浓缩的技术和设备却不过关。如从美国进口这样的成套设备，1997年前的价格是120万美金。

现在国内各种蛭弧菌形态结构的图片均是出自我这里，均是我提供的。蛭弧菌在普通光学显微镜下是看不到的，必须要在位相差显微镜下才行。国家科技部、农业部、知识产权局等有关部门批准的所有证件也都是授予我的。

蛭弧菌是不会耗氧的，也不会产气，所以包装瓶是不会涨起来或是扁壁的。如果包装瓶涨起来或是扁壁的，那它就不是蛭弧菌微生物生态制剂。事实上，蛭弧菌微生物生态制剂是可以鉴别的，但它要求的设备高、成本高、检测要求也高。然而，它可以通过视觉和嗅觉从表面观察到。蛭弧菌生长过程中不能利用人工合成培养中，所以蛭弧菌微生物生态制剂只能是半透明、浑浊的、蛋白质淡淡的香味的液体（因为里面含有菌体）。

十一、为什么养殖水体弧菌检测有时多有时少？

主要有以下原因，造成养殖水体的弧菌检测结果的判定不可能准确，更不能作为是否要用药的依据。

1、检测弧菌的试剂盒不稳定：

现在市场上销售的弧菌检测试剂盒（平板）良莠不齐，质量很不稳定。如抑制剂的添加量就会影响弧菌菌落的形成数量，抑制剂量大些菌落数量就会形成的少，反之抑制剂量小些菌落数量就会形成的多。再者，许多厂家生产的检测弧菌的试剂盒杂菌和霉菌丛生。

2、取水样方法不规范：

水样检测应取水下20公分的水，而且应该多点、分层取样，不能在一个地方一次性灌满一瓶水。取水样的点应相对固定，不能这次在虾塘南边取水，下次又在虾塘北边取水。更不能这次取这个塘的水，下次取另一个塘的水。

3、检验用水样不准确：

吸管取水样操作不当误差很大，有经验的专职检验人员用吸管取样是有标准和要求的，如手持吸管角度应为45度。以1毫升吸管为例如，45度角1点水是0.025毫升,15度角1点水是0.04毫升, 90度角1点水是0.015毫升。另外厂家提供的塑料吸管是不规范的也是不符合标准的，误差更大。

4、取水样用瓶子本身有细菌：

取样的瓶子应该严格消毒，如果没有彻底消毒的瓶子本身就有细菌，这样就无法说清楚检测出的细菌是水体里的还是瓶子里的细菌。虾农往往随手拿个矿泉水瓶子或者拿个饮料瓶去取水，这个检测就没有任何意义。

5、培养条件不一致：

弧菌培养要求温度是37℃，如果不是在恒温培养箱用37℃培养，在室温环境培养，由于室温温差的原因必定严重影响弧菌菌落形成的数量。

6、弧菌无法鉴定：

在市场上销售的弧菌检测试剂盒检出菌落只能说是细菌，不能说肯定就是弧菌。因为抑制性再强的培养基也会有杂菌菌落的形成。没有经过相关鉴定，就不能说在市场上销售的弧菌检测试剂盒检出的菌落就说是弧菌，即使就是弧菌，也无法判定是不是引起虾发病或者死亡的弧菌。因为水体中有许多不致病的弧菌。

鉴于上述众多原因，我认为现在市场上销售的弧菌检测试剂盒用于弧菌检测完全是一种商业行为，根本不可能为虾农解决什么问题。虾农的所谓弧菌检测也是一种心理安慰。弧菌检测不能用于判定是否要用药的依据。反之，如果能严格控制上述6个方面的因素，那么弧菌检测才是有意义的。

十二、乳酸菌不能阻断水产养殖中弧菌的生长繁殖

最近在水产药品销售市场流传一种奇谈怪论：乳酸菌能阻断水产养殖水体及水生物弧菌的生长繁殖！这纯粹是某些水产药品生产销售不法厂商，针对目前水产养殖弧菌病多发和流行的现象散布谬论、误导消费者。本人就乳酸菌的种类、 功能特征、 作用原理、在水产养殖中的应用等综述如下，供大家讨论、以正视听。

乳酸菌是发酵糖类且主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。乳酸菌是一群相当庞杂的细菌，目前至少可分为18个属，共有200多种。

1、种类

虽然乳酸菌的属性和种类很多，但从它的产生来源我们仍可以很清晰的把乳酸菌分为两大类：

（1）动物源乳酸菌

取自动物，因菌种常处于相对不稳定状态，其生物功效也较不稳定，且在大量食用时，很容易导致人体动物蛋白过敏，即排斥反应。

（2）植物源乳酸菌

因为取自植物易被人体吸收，不论摄取多大的量，人体不会产生异体蛋白排斥反应，且植物源乳酸菌比动物源者更具有活力，能比动物源多8倍的数量到达人体小肠内定植，从而发挥其强大而稳定的生物功效。

5000年前人类就已经在使用乳酸菌，并不是现代人的发现。

2、功能特征

一株好的乳酸菌菌种生产的微生态制剂在水产养殖应用，主要功能是：改变水生物肠道菌群的构成，改善胃肠道功能，维持肠道内菌群平衡，形成抗菌生物屏障。但绝对没有，也不可能有阻断弧菌生长繁殖的作用。

什么叫阻断？由于某一物质阻止而中断（某事的）进程或进展叫做阻断。

什么是阻断药物？阻断药物是指病毒在转录过程中起主导作用的底物或竞争性抑制药，从而阻止病毒复制的药物。这类药物主要分为以下5 类。 ( 1 )核昔类。主要治疗免疫缺陷病 及其相关综合征，有严重的不良反应，需长期或终身用药。 ( 2 )非核营类逆转录酶抑制药。该药可与其他抗病毒药合用治疗病毒感染。 ( 3 )蛋白酶抑制药。该类药物与核昔类联用可有效地抑制病毒复制，并减少不良反应。 ( 4 )侵入抑制药。本类药物以干扰病毒与宿主细胞的粘附融合而达到抗病毒的作用。 ( 5 )整合酶抑制药。这类药物抑制整合酶对病毒基因与宿主细胞基因的整合作用。

目前无论用于人体还是动物阻断治疗的药物很少，而且用于阻断治疗的药物都是用于病毒，而不是细菌。用于阻断细菌DNA合成的药物均为抗生素。而乳酸菌及其代谢产物绝没有阻断养殖水体或水产品中弧菌生长繁殖的作用！

3、作用原理

乳酸菌在水生动物体内能发挥作用的原理就是生物拮抗，没有阻断弧菌生长繁殖的功能。

什么叫生物拮抗？生物拮抗是指微生物之间的互相抵制、互相排斥、互相竞争生存空间和条件、甚至互相残杀的斗争。一个安定的、处于生物平衡的正常微生物群，对养殖水体和水产品中外籍菌有明显的生物拮抗作用。导致生物拮抗的原因，是微生物及其产生的多种分泌物质的作用，其中厌氧菌起着重大作用。

生物拮抗大致有以下几种形式：

（1）改变养殖水体及水生物微环境。细菌生长过程产生的有机酸降低了养殖水体及水生物环境中的pH值，抑制了外籍菌，促进肠蠕动，清除外籍菌。

（2）占位。细菌与水生物黏膜上皮细胞紧密结合形成“占位”性保护（生物屏障），从而排斥外籍菌。

（3）营养争夺。由于厌氧菌（多数是有益菌）在其特定的水生物环境内数量很大，在与外籍菌的营养争夺上处于优势，从而限制了外籍菌的生长繁殖。

（4）分泌抗菌物质。在生物发酵过程中微生物产生的抗菌物质的作用至关重要，对外籍菌具有强大的抑制力、杀伤力。

（5）免疫作用。正常微生物群与宿主的免疫力配合，也可产生很有效的生物拮抗。

 4、乳酸菌在水产养殖中的应用

 乳酸菌是被人类作为食品微生物利用的一大类菌，尤其在增强牛奶保健功能、提高青贮品质、提高畜禽生产性能、降低畜产品贮藏对肉品风味的影响等方面已取得较好效果，广泛应用于食品、医药、轻工业和畜牧业等领域。

目前在水产上对乳酸菌的报道主要集中于乳酸菌在水产动物肠胃和其他内脏器官中的栖息情况。乳酸菌在水产养殖上的应用较多，主要是拌入饲料一起投喂给水生物动物，或做为EM菌的主导菌在水体泼洒。

向养殖水体投放乳酸菌改良养殖水体环境，抑制水体中有害菌的繁殖生长，调节藻相平衡，控制有害菌藻。

5、乳酸菌能否阻断养殖水体或水生物中弧菌的生长

无论从乳酸菌功能特征，还是作用原理都证明：乳酸菌不能阻断养殖水体或水生物中弧菌的生长繁殖。一些不法厂家，针对目前水产养殖弧菌病多发和流行的现象，为了获得更多的商业利润，散布谬论、误导消费者。这种不负责任的夸大其词过度的宣传乳酸菌的作用，其用心何在？于心何忍？